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    實際篩選標準血清具體方法介紹
  • 發布日期:2024-01-08      瀏覽次數:115
    •     現常用血清主要是牛血清、人血清、馬血清等。其中牛血清來源充足、制備技術成熟、經過長時間的應用考驗人們對其有比較深入的理解,故而是常用的血清。牛血清有小牛血清、新牛血清、胎牛血清。胎牛血清是品質高的,因為胎牛還未接觸外界,血清中所含的抗體、補體等對細胞有害的成分最少。

        血清的質量標準:

        1. 內毒素標準為不高于5EU/ml

        2. 總蛋白含量胎牛血清一般范圍是30-40mg/ml,數值偏高偏低都會影響實驗的正常進行

        3. 血紅蛋白標準為不高于20mg/dl

        4. pH。國產血清、大多高于7.5,進口胎牛血清,大多低于7.5,根據PH的高低可用來初步鑒別血清的來源

        5. 微生物。包括細菌、霉菌、支原體、噬菌體、各類病原性病毒等,大多都能清除。大腸桿菌噬菌體無法過濾,很難清除,但對血清質量影響不大。病原性病毒,在國產血清中幾乎90%以上都存在,是影響國產血清質量的重要原因之一。

        

          在實際篩選時,主要從血清外觀和實驗操作時細胞的生長狀態進行。

        從外觀上:

        1. 顏色:根據血紅蛋白含量的不同,胎牛血清可表現出黃色或紅色,這個指標的意義在于能體現出采血過程的嚴謹規范程度。胎牛血清或多或少總有點溶血,因為胎牛血清凝血功能差,紅細胞容易破裂;

        2. 澄清度:高質量的胎牛血清由于蛋白和脂類等物質含量低,表現為稀薄、清淡;

        3. 血清沉淀:血清中的沉淀是由纖維蛋白的凝聚產生,對血清質量沒有影響,沉淀的產生原因跟加工生產方式、是否反復凍融密切相關,在實驗操作中可能會對細胞觀察產生影響。

        從性能上:

        1. 細胞形態,在進行血清篩選時首先觀察細胞的生長形態是否產生明顯變化,以及觀察貼壁細胞的貼壁情況,細胞在不同血清培養中可能會出現形態上的差異;

      2. 倍增時間,一般情況下會選擇倍增時間短的血清,值得注意的是血清的影響會傳至5代,在進行測試時,最好培養五代后進行計倍增時間的計算。


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