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    大鼠elisa試劑盒操作方法的步驟
  • 發布日期:2021-04-16      瀏覽次數:1039
    • 大鼠elisa試劑盒操作步驟

      1.標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。

      2.加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣 50µl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液 40µl,然后再加待測樣品 10µl(樣品終稀釋度為 5 倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。

      3.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。

      4.配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用

      5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此重復 5 次,拍干。

      6.加酶:每孔加入酶標試劑 50µl,空白孔除外。

      7.溫育:操作同 3。

      8.洗滌:操作同 5。

      9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50µl,再加入顯色劑 B50µl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色
      15 分鐘.

      10.終止:每孔加終止液 50µl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。

      11.測定:以空白空調零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應在加終止液后 15 分鐘以內進行。

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